一起科研走花路，探索你不知道的酵母杂交筛选小技巧-自主发布-资讯-生物在线

作者：武汉金开瑞生物工程有限公司 2022-01-18T21:30 (访问量:3008)

一起科研走花路，探索你不知道的酵母杂交筛选小技巧。酵母杂交的筛选可以简单理解为一场浩瀚的自由恋爱相亲大会。一个蛋白可以与很多很多蛋白发生相互作用，在不同的时间场所，最终会有一些强烈心仪的对象。那满足酵母杂交筛选的条件就可以简单设想为提高这场相亲成功概率所做的准备，简单概括为以下几点：

一、参与的男女嘉宾必须衣冠整齐，活力四射，双方到底是要见面的，最明显的就是会先打扮一下自己。那么酵母的相亲也不例外，优质的文库可供选择，诱饵的转化效率以及活力都要保持在一个较高的水平，茫茫蛋白，一眼望去-yeah excellent men!

二、沉默就是破铜烂铁，陌生人第一次见面，想要相亲成功，沟通极其重要。如果不制造共同话题那必然是黯然退场。同理那酵母的相亲也一样，要么提高共转效率，要么控制好诱饵和文库的比例，增加相互碰撞的几率，速率不能过快，要给两个蛋白充分的时间结合产生相互作用，这样才能提高来电概率。

三、感情除了有一见钟情，还有日久生情。所以杂交的筛选时间上也会有不同，可以根据具体诱饵具体控制分析，作用强弱可根据信号强弱进行判断，毕竟与诱饵匹配的另一半适合的有很多，信号最强的就是能使之怦然心动的另一位。

言归正传，文库构建筛选的流程通常如下所示：

1. 核酵母文库构建筛选实验流程

建库

双杂筛选

matting方式

共转

单杂筛选

2. 膜酵母文库构建筛选实验流程

建库

共转

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