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【诊断】抗原检测,没你不行——新冠变异毒株N蛋白

作者:北京百普赛斯生物科技股份有限公司 2021-09-23T16:02 (访问量:8686)

在新冠药物和疫苗的研究中,很多注意力都集中在直接介导新冠病毒感染人体细胞的刺突(S)蛋白上。随着人们对新冠病毒的认知越发深入,其他新冠病毒蛋白的重要作用也逐渐被揭晓,其中包括帮助病毒RNA在宿主细胞内转录和复制的核衣壳(N)蛋白。

N蛋白是新冠病毒感染过程中含量最丰富的病毒结构蛋白,在病毒感染人体细胞后会大量表达,引起强烈的免疫反应。N蛋白的基因序列相对保守稳定,与谱系上最接近的SARS-CoV N蛋白存在约90%的同源性;相比S蛋白,N蛋白上随着时间推移产生的突变更少。因为其良好的免疫原性和稳定性,N蛋白常作为新冠病毒的检测靶标,国内外体外诊断(IVD)公司已开发出很多新冠抗原检测试剂盒,用于病例筛查和疫情监控。

新冠N蛋白含有419个氨基酸,分子量约为47.4 kDa。N蛋白可分为五个结构域:N端结构域(NTD),RNA结合域(RBD),中间连接区域(LINK),二聚化域(Dimerization domain)和C端结构域(CTD)(图1)。N蛋白上的突变频率虽然不高,但因为新冠病毒在全球范围内的快速传播,流行突变株中的N蛋白上已经出现了特征性突变位点,其中位于LINK上的R203K/G204R是最常见的高频突变。此外,备受关注的N突变还包括常见于南非突变株的T205I,巴西突变株的P80R,英国突变株的D3L/S235F,印度突变株的D63G/R203M/D377Y/R385K等等。

图1. N蛋白序列和结构域

N蛋白上发生的突变是否会影响抗原检测试剂盒的灵敏度?

作为新冠抗原检测的主要靶标,N蛋白上发生的突变是否会影响抗原检测试剂盒的灵敏度还有待评估。面对全球不断出现的变异毒株,已经上市或仍在研发的抗原检测试剂盒应当对主流变异毒株的N蛋白进行测试,来确保试剂盒的灵敏度和准确性不受到影响。

为助力新冠抗原检测试剂盒的开发,ACRO现已开发一系列野生型及变异毒株的N蛋白抗原,涵盖主流突变毒株的高频突变,可作为质控抗原,用于抗原检测试剂盒的开发。产品特点如下:
> HEK293真核系统表达,具有天然构象,能够有效识别抗体
> 纯度高、稳定性好,具有良好的批间一致性

验证数据
经ELISA验证,ACRO应用于抗原检测试剂盒开发的配对抗体原料(Cat.No. NUN-M223NUN-S95)能够识别所有检测的变异株N抗原,验证数据如下(图2):

图.2. NUN-M223/NUN-S95能够与新冠病毒变异株N抗原结合, 且与野生型毒株N抗原的结合力接近

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新冠病毒变异毒株N蛋白

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