在细胞实验中,细胞转染大概是最常用、最基础的实验技能。转染细胞的方法很多,PEI(polyethylenimine,聚乙烯亚胺)转染是其中一种性价比极高的转染方法。在HEK293和CHO等细胞中转染效率较高,常用于大规模瞬时转染表达。与磷酸钙相比,PEI转染试剂制备容易,适用的细胞种类更多,性价比也更高;而与脂质体等转染试剂相比,对细胞毒性小。难以瞬时转染的细胞,用PEI进行慢病毒包装,也非常方便,病毒滴度满足大多数细胞的稳转要求。
PEI的转染原理是:PEI是一种带有高电荷阳离子的多聚物,能将 DNA 缩合成带正电荷的微粒,这些微粒可以黏合到带有负电荷的细胞表面残基,并通过胞吞作用进入细胞。一旦进入细胞,胺的质子化导致反离子大量涌入以及渗透势降低,在低pH环境中实现DNA胞内释放。最被接受的观点是PEI上未质子化的胺可以在与膜结合的细胞器(如溶酶体)中吸收氢离子,这将导致更多氢离子的流入,同时带来更多的氯离子和水,诱发渗透溶胀。而质子化胺之间的排斥引起PEI构象的改变,上述变化导致的渗透膨胀使囊泡释放聚合物与 DNA 形成的复合物进入细胞质。复合物拆解后,DNA 能自由的融合到细胞核中。
Celthy Polyethylenimine Linear (PEI) 转染试剂是一种化学合成、不含动物源成分、经优化改造后的线性化PEI转染试剂,同时针对较难的细胞提升了转染效率。
产品特点
适合转染DNA, 细胞密度在70%~80%时,转染效率可以达到80%以上;
既适合贴壁细胞,也适合悬浮细胞转染,可满足瞬时转染和稳定转染;
转染细胞形态良好并表达大量的目的蛋白,适用于大规模的转染;
纯化学合成,不含动物源成分,细胞毒性极低;
兼容抗生素与血清。
产品性能
转染效率80-90%
左图. Celthy PEI转染GFP质粒到贴壁细胞Hek-293,72h后,转染效率达到90%。
右图. Celthy PEI转染GFP质粒到悬浮细胞CHO-K1,72h后,转染效率达到80%。
更高的转染效率
图. 用AAV-GFP表达质粒转染悬浮细胞293V细胞后的48h荧光图(质粒与试剂比例为1:1)。
左图为Arcegen PEI转染试剂,右图为其他PEI产品。
图. 用AAV-GFP表达质粒转染贴壁细胞293T细胞后的48h荧光图(质粒与试剂比例为1:1)。
左图为Arcegen PEI转染试剂,右图为其他PEI产品。
产品常见问题
1、转染试剂能否冻存冻?
转染试剂不可以冻存,应于2-8℃保存。
2、转染后是否需要换液?
若转染前进行了换液,可不进行换液,若需要换液可在转染后6-8h可以进行换液。
3、转染的时候是否需要无血清培养基培养?
制备复合物的时候需要使用无血清培养基,加入细胞中的时候不要求无血清培养。
产品订购
产品应用 |
产品名称 |
产品货号 |
293细胞 DNA,AAV/LV载体研发与工艺开发 |
C130006 |
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